RNA/DNA病毒基因组提取试剂盒

RNA/DNA病毒基因组提取试剂盒

原理简介
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因组，也可用于DNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳，放出RNA/DNA，用玻璃奶吸附达到纯化目的。
使用本试剂盒提取的RNA/DNA可用于各种常规操作，包括RT-PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

注意事项
1．一般病毒含量过低，zui后提取的基因组RNA/DNA电泳无法检测到，但RT-PCR/PCR等其他实验还会有结果。
2．同一样本，如果想大量提取，可以增加样本量，并且每一步试剂加量，但使用次数会成倍减少。
3． 所有离心步骤用低温离心机在4℃条件下离心，如果实验室没有低温离心机，也可以使用常温离心机，但所提得的RNA可能会降解严重些。

操作步骤
准备工作：使用前请先开启一瓶新的无水乙醇，倒入漂洗液中，倒满至离瓶口约0.5-1ml，盖上瓶口，摇匀。
1、 取病毒上清液0.5ml，12000rpm离心5min，尽量取上清使用，弃去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K，充分混匀，65℃消化10-20min，期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 向管中加入500ul结合液，充分混匀。
4．玻璃奶摇匀。加入25ul摇匀的玻璃奶，混匀，室温放置2分钟，10000转/分钟离心1分钟，去上清；沉淀加入800ul漂洗液，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，再用600ul漂洗液洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
7．室温放置10分钟，加入30－50ul洗脱缓冲液混匀溶解，静置5分钟。离心，取上清为所提RNA。